Microscòpia de camp fosc: habilitats essencials i coneixement dels principis
En primer lloc, parlem de l’estructura i les característiques del microscopi de camp fosc, per què s’anomena microscopi de camp fosc, quins experiments poden utilitzar -lo i com utilitzar -lo bé. Tindreu una comprensió detallada d’aquest article.
El primer és l'estructura del microscopi de camp fosc. A la nostra vida diària, no és fàcil veure la pols de partícules que volava a l’interior, però en una habitació fosca, si un feix de llum prové obliqüament de la fissura de la porta, es poden veure partícules de pols, que és un fenomen de Dindar òptic. El microscopi de camp fosc està dissenyat a partir d’aquest principi. La seva característica estructural és utilitzar principalment una placa d’ombrejat central o un condensador de camp fosc, que s’utilitza habitualment com a condensador parabòlic, de manera que el feix central de la font de llum estigui bloquejat i no pot entrar a la lent objectiva a través de la mostra de baix a dalt. De manera que la llum canvia el seu camí i brilla oblicament en la mostra observada, i l'exemplar reflecteix o es dispersa quan compleix la llum, i la llum dispersa es posa a la lent objectiva, de manera que tot el camp de visió és fosc. El que s’observa en el camp fosc és la imatge de llum difractada de l’objecte inspeccionat, no l’objecte en si, de manera que només es pot veure l’existència i el moviment de l’objecte i no es pot distingir l’estructura fina de l’objecte. Tanmateix, quan l'objecte inspeccionat és heterogeni i més gran que 1/2 de longitud d'ona, tots els nivells de raigs difractats entren a la lent objectiva alhora, i es pot observar fins a cert punt l'estructura de l'objecte. Tot i que el microscopi general de camp fosc no pot veure amb claredat l’estructura fina de l’objecte, pot distingir l’existència i el moviment de les partícules per sobre de 0. 0 04 UM, que és una característica que els microscopis ordinaris (la resolució màxima és de 0,2 um), i es pot utilitzar per observar l’estructura de les cèl·lules vives i el moviment de les partícules de les cel·les.
Per fer la placa d’ombra central, el microscopi ordinari es pot convertir en un microscopi de camp fosc sempre que el condensador sigui desmuntable i el diàmetre del suport és adequat per instal·lar el condensador de camp fosc. Quan no hi ha cap condensador de camp fosc, es pot fer una placa d’ombrejat central de paper negre gruixut i col·locat al marc del filtre sota el condensador del microscopi ordinari i també es pot obtenir l’efecte de camp fosc.
Ajusteu el condensador del microscopi a la posició més alta i alineeu la longitud focal amb un mirall de baix consum.
Traieu l’ocular, observeu i ajusteu la mida del diafragma del barril de la lent per fer -lo igual al camp de vista de la lent objectiva vista al canó de la lent.
Talleu l'escut de llum central amb paper negre gruixut. El diàmetre de l’anell exterior és el mateix que el del marc del filtre, i la mida de la part central és la mateixa que la de l’obertura ajustada del diafragma (un petit paper translúcid es pot col·locar a la superfície del mirall del condensador al forat de la llum i la taca de llum que es mostra al paper és l’obertura del diafragm i, a continuació, la mida es pot mesurar amb una brúixola).
Poseu l’escut de llum central al marc del filtre i obriu l’obertura per observar la mostra.
Si cal observar el camp fosc amb un mirall de gran potència, l’escut de llum central s’ha de remetre segons la mida del camp de vista després de centrar-se amb el mirall d’alta potència.
Deseu les plaques d’ombrejat central fetes per ells perquè es puguin utilitzar en experiments posteriors.
Mètode d'aplicació. Instal·leu el condensador de camp fosc al suport del condensador del microscopi.
Trieu una font de llum forta, però eviteu que la llum directa entri a la lent objectiva, de manera que generalment utilitzeu una làmpada de microscopi per a la il·luminació.
S’ha d’afegir una gota d’asfalt fragant entre el condensador i l’exemplar per evitar que la llum d’il·luminació es reflecteixi totalment al condensador i no es pugui arribar a l’objecte detectat de manera que no es pugui obtenir la il·luminació del camp fosc.
Aixecant el col·lector de llum, apuntant el focus del col·lector de llum a l'objecte detectat, és a dir, irradiant l'objecte detectat amb el vèrtex del feix de con. Si el condensador es pot moure horitzontalment i està equipat amb un dispositiu d’ajust central, l’ajust del centre s’ha de dur a terme primer perquè l’eix òptic del condensador i l’eix òptic del microscopi es trobin estrictament en línia recta.
Seleccioneu la lent objectiva corresponent al condensador, ajusteu la longitud focal (el mètode de funcionament és el mateix que el del microscopi ordinari) i trobeu la imatge de l'objecte que s'ha d'observar.
Finalment, observeu les cèl·lules vives sota el microscopi Darkfield a la plataforma d’ensenyament. Al fons fosc, es poden veure les imatges de llum difractades de cèl·lules, nuclis i orgànuls.
